Etiqueta: Laboratório

    • Protocolos de criopreservação

      Protocolos de criopreservação

      As células a ser criopreservadas devem estar em passagens iniciais, entre a 4ª e a 9ª passagem (P4 a P9) (idealmente de P5 a P7), devido à preservação das características genéticas e funcionais ainda estáveis. As células devem estar em fase logarítmica (log phase) com uma confluência ~80%. O número de células aderentes a criopreservar…

    • Quando as células não crescem

      Quando as células não crescem

      Quando estamos perante uma cultura de células que não cresce, ou seja, as células não proliferam, e tendo em conta que o meio está devidamente aditivado, temos de tomar algumas medidas, e uma delas é suplementar o meio. O tipo de meio A relação entre a quantidade de glucose do meio e o crescimento celular…

    • Sedimentos no DMEM

      Sedimentos no DMEM

      Embora sedimentos no meio de cultura possam deixar o laboratório em pânico pelo risco de contaminação, estes podem apenas indicar reação de precipitação normais. Neste caso o meio pode ser usado normalmente após ressuspensão com pipeta serológica. Figura 1. DMEM normal. Figura 2. DMEM com precipitados brancos (glutamina). Para descartar a hipótese de contaminação, deve…

    • Otimização do ensaio MTT

      Otimização do ensaio MTT

      O ensaio MTT (dimethylthiazol ou dphenyltetrazolium bromide) é um ensaio colorimétrico específico para a viabilidade celular, e é usado em ensaios de citotoxicidade. Nas células viáveis, o MTT reage com as desidrogenases mitocondriais, e é convertido em cristais de formazan. Esta transformação leva a que o MTT mude a sua cor, inicialmente amarela, para roxo…